- Esse exame requer um jejum mínimo de 3 horas.
- O teste compreende a coleta de uma amostra de sangue pela manhã, entre 7 e 10 horas (o ideal é que seja às 8 horas) e de outra após o almoço, entre 16 e 17 horas (o ideal é que seja às 16 horas). Essas coletas devem ser realizadas no mesmo dia.

ATENÇÃO: No caso das unidades Chácara Klabin, Granja Viana, Oscar Americano e São Bernardo do Campo, os clientes devem retornar em outra unidade no período da tarde, para a realização da segunda coleta, pois as unidades mencionadas tem horário de funcionamento até as 12:30.
- O cliente deve informar ao Fleury os medicamentos em uso, em especial os glicocorticóides.
- O uso de biotina e suplementos alimentares que contenham biotina devem ser suspensos 3 dias antes da coleta.

- Aguardar 30 minutos;
- Centrifugar a 2200 g por 10 minutos a 18 ºC;
- Não aliquotar;
- Enviar à seção, em temperatura ambiente;
- Volume: 0,5 mL de soro;

Interferentes: presença de EDTA/citrato na amostra.

Estabilidade da amostra:
Temperatura ambiente: 2 dias;
Refrigerada (2-8 ºC): 7 dias;
Congelada (-20 ºC): 2 anos.

- Imunoensaio competitivo quimioluminescente.

- Entre 7 e 9 horas: 6,0 a 18,4 microg/dL

- Entre 16 e 17 horas: 2,7 a 10,5 microg/dL

- O nível de cortisol sérico obedece a um ritmo circadiano. Assim, os valores máximos são observados nas primeiras horas da manhã e os mínimos, à noite. Na síndrome de Cushing, ocorre perda desse ritmo.
- Convém destacar que o uso de glicorticóides interfere no resultado deste teste.