Este exame pode ser realizado em urina.
- Para a coleta de urina, o volume mínimo necessário é de 20 mL.
- No caso de urina colhida fora do Fleury, é preciso retirar previamente no Fleury as instruções impressas e o frasco estéril.
- Há restrições para o horário de entrega nas unidades, sendo necessário consultar a Central de Atendimento ao Cliente.

URINA:
- Caso a urina tenha sido coletada com alcalinizante fornecido pelo Fleury, verificar o volume total, que deve ser de 20 ml. Se o volume for superior a 20 ml, verificar o pH utilizando fita de pH. O pH deve ser igual ou maior que 7,1. Caso o pH seja < 7,1 solicitar nova coleta.
- Caso a urina tenha sido coletada sem alcalinizante, mas tenha sido trazida ao laboratório em até 1 hora após a coleta, adicionar 1 ml de solução de tampão fosfato 0,4M pH 7,6 para cada 10 ml de urina. Homogeneizar.


- Enviar refrigerada para o Setor de Microbiologia.



Estabilidade da amostra:
Urina alcalinizada
- temperatura ambiente: 1 hora
- refrigerado: 24 horas
- congelado: não aceitável

Cultura negativa.

As leptospiras podem ser isoladas de amostras de sangue, líquor ou líquido de diálise peritoneal durante os 10 primeiros dias de doença, enquanto a detecção em amostras de urina só é possível a partir da segunda semana de doença. A excreção de leptospiras na urina pode permanecer por várias semanas em pacientes sem tratamento antimicrobiano.
O isolamento de leptospira em cultura requer o uso de meios específicos e incubação a 30ºC por até 6 semanas.
Um vez a cultura positiva, a identificação da espécie é confirmada por sequenciamento parcial do gene rRNA 16S.
Alguns estudos têm demonstrado que a pesquisa do DNA por PCR em tempo real tem sensibilidade igual ou maior que aquela da cultura e permite o diagnóstico rápido, na fase aguda.
A sorologia pareada, testando-se amostras de soro coletadas nas fases aguda e de convalescência é o teste com maior sensibilidade para o diagnóstico de leptospirose.

Cultura em meio EMJH