Não manusear;

Estabilidade da amostra:
Temperatura ambiente: não aceitável;
Refrigerada (2-8 ºC): 24h;
Congelada (-20ºC): não aceitável.

A expressão de CD107a em células NK é utilizada como marcador funcional de degranulação citotóxica e é avaliada por citometria de fluxo. Após o isolamento dos PBMC, as células são submetidas a diferentes condições de estímulo, como cocultura com células K562 ou ativação com PMA/Ionomicina, além de uma condição basal para controle. Durante a incubação, a expressão de CD107a é monitorada na superfície celular como indicativo da liberação de grânulos citotóxicos. Após o estímulo, as células são coradas com anticorpos contra CD3 e CD56 para identificação do compartimento NK (CD3?CD56?) e analisadas por citometria de fluxo. Essa abordagem permite avaliar a capacidade funcional das células NK em diferentes contextos de ativação.

Normalidade: expressão de CD107a acima de 5%

A avaliação da expressão funcional de CD107a (LAMP-1) em células NK (natural killer) por citometria de fluxo representa uma ferramenta diagnóstica importante para investigar a capacidade citotóxica do sistema imune inato. CD107a é uma proteína de membrana lisossomal que se transloca para a superfície celular durante o processo de desgranulação, atuando como marcador indireto da liberação de grânulos citotóxicos.
A detecção da expressão de CD107a na membrana de células NK ativadas é indicativa de uma resposta funcional adequada, enquanto níveis reduzidos ou ausentes podem sugerir defeitos na via de desgranulação, como ocorre em formas primárias de hemofagocitose linfo-histiocítica (HLH) ou em outras imunodeficiências primárias. Além disso, alterações na expressão de CD107a também podem ser observadas em condições clínicas secundárias, como infecções virais crônicas, neoplasias hematológicas e uso de imunossupressores.
O ensaio é realizado por meio da incubação de células mononucleares periféricas com estímulos específicos na presença de anticorpos monoclonais anti-CD107a, permitindo a detecção da proteína na superfície celular durante a ativação. Essa abordagem funcional oferece vantagens em relação à análise de proteínas intracelulares, pois permite avaliar diretamente a capacidade de resposta das células NK em tempo real.
É importante ressaltar que resultados isolados devem ser interpretados com cautela. Pacientes portadores de variantes genéticas que afetam etapas posteriores à desgranulação, podem apresentar expressão normal de CD107a, apesar de disfunção citotóxica. Por outro lado, variantes que afetam diretamente a maquinaria de exocitose podem resultar em expressão diminuída, mesmo na presença de proteínas citotóxicas funcionais.