I - Informações sobre o exame: Este exame é realizado em peças cirúrgicas ou em fragmentos de biópsia de tumores primários ou metastáticos de cólon e reto, bem como de adenocarcinomas de pulmão e tiroide e detecta mutações nos códons 12, 13, 61, 117 e 146 do gene KRAS. II - Critérios de realização: - Para a realização deste exame é necessária solicitação médica. - É imprescindível que seja fornecida cópia do laudo original da análise do material. - Poderão ser aceitos os seguintes materiais: - Fragmentos de tecido fixados em formalina 10% tamponada, embebidos ou não em parafina (enviar em temperatura ambiente); - Lâminas de corte histológico (enviar em temperatura ambiente) (10 lâminas; seção de 5µm de espessura e 1 lâmina corada pela hematoxilina-eosina (HE); - Esfregaços com ou sem lamínula (enviar em temperatura ambiente); - Material fresco congelado ou enviado em meio de conservação para ácidos nucléicos em temperatura ambiente. ATENÇÃO: Não será aceita lâmina com resina ao invés de lamínula ou material fora das condições citadas acima. - O material em bloco de parafina deve ser fixado previamente em formalina o mais rápido possível após a biópsia ou cirurgia. O material enviado em formol deve preferencialmente ter sua fixação de no mínimo seis horas e, no máximo, 48 horas. A adoção desse cuidado e a coleta de amostras suficientemente volumosas do tumor garantem o sucesso do teste. - É importante salientar que o material enviado sempre será analisado por um médico patologista antes da análise do exame. Dessa forma, se o material enviado for insuficiente ou inadequado para o teste, o mesmo não poderá ser realizado.É necessário que o tecido tenha células tumorais presentes e em quantidade superior a 20%.
- Enviar o material (lâminas, esfregaços, material fresco ou blocos de parafina) à Seção de Anatomia Patológica junto com cópia do laudo original (quando o material não tiver sido analisado no Fleury) em temperatura ambiente.
Sequenciamento de nova geração para avaliação de mutações pontuais nos códons 12, 13, 61, 117 e 146 do gene KRAS, com frequência alélica mínima de 2%.
O gene KRAS faz parte da família de oncogenes Ras, juntamente com NRAS e HRAS. As proteínas codificadas pelos genes desta família são GTPases que participam de processos celulares como divisão, diferenciação e morte celular. Mutações ativadoras em KRAS, localizadas nos códons 12,13, 61, 117 e 146, levam à ativação constitucional da proteína, e estão associadas à resistência aos inibidores de tirosina quinase que tem como alvo o EGFR (receptor do fator de crescimento epidérmico). Estas mutações são mais frequentemente encontradas em carcinoma colorretal e em adenocarcinoma de pulmão. Este exame deve ser realizado em amostra de tecido que contenha no mínimo 20% de células tumorais; a sensibilidade de detectar a mutação fica comprometida quando existe uma quantidade menor de células neoplásicas.
Mutação não detectada. O resultado será acompanhado de um relatório interpretativo.
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