Manual de exames

HIV-1, Resistência a Medicamentos Antiretrovirais, plasma

Outros nomes: GENOTIPAGEM P/INIBIDORES DA PROTEASE, GENOTIPAGEM P/INIBIDORES DA TRANSCRIPTASE REVERSA, Genotipagem para HIV, HIV, GENOTIPAGEM, HIV, RESISTENCIA A DROGAS, HIV-1, DETECCAO DE MUTACOES DO VIRUS, RESISTENCIA, HIV-1, RESISTENCIA A DROGAS ANTIRETROVIRAIS, HIV-1, Resistência a Medicamentos Antiretrovirais, HIV-1, RESISTENCIA AO COQUETEL, MUTACOES DO HIV-1, RESISTENCIA A DROGAS, Resistance to HIV 1 antiretroviral drugs, Resistência do HIV 1 a drogas antiretrovirais, Resistência a Inibidores de Integrase, Inibidores de Transcriptase Reversa, Resistência a Inibidores de Protease, resistência as drogas HIV

Este exame não precisa ser agendado

Processamento e adequação da amostra

Receber a amostra em embalagem REF e mantê-la nesta condição até a manipulação.
Dentro de, no máximo, 4 horas após a coleta, centrifugar o material por 10 minutos a 2200 g, a 18 °C;
Aliquotar o plasma em tubo plástico estéril;
Enviar à seção congelado.

Estabilidade da amostra:
Temperatura ambiente: não aceitável;
Refrigerada (2-8 ºC): 4 horas;
Congelada (-20 ºC): 1 mês.

ATENÇÃO: NÃO RECEBER amostras intensamente hemolisadas, lipêmicas ou hiperbilirrubinêmicas.


Método

Sequenciamento das regiões codificantes da protease (codons1-99), transcriptase reversa (codons 1-320) e integrase (codons1-288) do HIV-1. Este exame é realizado pelo método de sequenciamento de próxima geração (NGS), cujos resultados são reportados de acordo com parâmetros de qualidade definidos durante a validação. Com cobertura das regiões alvo de pelo menos 500x, o teste foi capaz de identificar o padrão de resistência do HIV-1 em 100% das amostras com resultado prévio de RT-PCR em tempo real maior ou igual a 1000 cópias/mL e em 95% das amostras com resultado maior ou igual a 500 cópias/mL.




Valor de referência

Ausência de mutações de resistência.

Interpretação e comentários

O teste é indicado para a avaliação do perfil de resistência/sensibilidade do HIV-1 aos medicamentos antirretrovirais. O exame é realizado por meio do sequenciamento de próxima geração dos genes da protease, transcriptase reversa e integrase do HIV-1 e da identificação de mutações que, quando presentes, podem determinar resistência aos inibidores dessas enzimas virais, utilizados no tratamento da infecção. A análise da combinação de mutações, que permite inferir o perfil genotípico de resistência aos medicamentos, utiliza o algoritmo de um banco de dados público curado (Stanford University HIV Drug Resistance Database), atualizado regularmente e reconhecido internacionalmente como ferramenta de escolha para este fim.
O exame permite analisar adequadamente os subtipos B e não-B do HIV-1.
Na prática, o teste detecta mutações que conferem resistência aos antirretrovirais descritos abaixo:
1) Inibidores da protease:
Atazanavir/r (ATV/r)
Darunavir/r (DRV/r)
Lopinavir/r (LPV/r)

2) Inibidores da transcriptase reversa análogos de nucleosídeos
Abacavir (ABC)
Zidovudina (AZT)
Emtricitabina (FTC)
Lamivudina (3TC)
Tenofovir (TDF)

3) Inibidores da transcriptase reversa não-análogos de nucleosídeos:
Doravirina (DOR)
Efavirenz (EFV)
Etravirina (ETR)
Nevirapina (NVP)
Rilpivirina (RPV)

4) Inibidores de Integrase
Bictegravir (BIC)
Cabotegravir (CAB)
Dolutegravir (DTG)
Elvitegravir (EVG)
Raltegravir (RAL)

O perfil de resistência genotípica não necessariamente reflete o fenótipo do vírus quando exposto às drogas, e sua interpretação deve considerar o histórico de esquemas de tratamento utilizados pelo paciente.


Orientações necessárias

- Não é necessário preparo para este exame.
- Esse teste é validado para amostras com carga viral igual ou superior a 500 cp/mL. Amostras com cargas virais inferiores a 500 cp/mL podem ser avaliadas, porém o resultado pode ser inconclusivo por falha de detecção do HIV-1 ou de mutações eventualmente presentes.
- Não é possível realizar o exame em pessoas sem carga viral detectada (resultado negativo ou indetectado).



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