Este exame é realizado apenas em urina, caso seja para ser realizado em sangue, líquor ou liquido de dialise peritoneal ver sigla especifica.
- Para fazer a coleta de urina, o cliente deve estar sem urinar há duas horas, pelo menos, pois o volume mínimo necessário é de 20 mL.
- Para colher a amostra de urina fora do Fleury, há necessidade de retirar previamente instruções impressas e frasco estéril.

Caso a urina tenha sido coletada com alcalinizante fornecido pelo Fleury, verificar o volume total, que deve ser de 20 ml. Se o volume for superior a 20 ml, verificar o pH utilizando fita de pH. O pH deve ser igual ou maior que 7,1. Caso o pH seja < 7,1 solicitar nova coleta.
- Caso a urina tenha sido coletada sem alcalinizante, mas tenha sido trazida ao laboratório em até 1 hora após a coleta, adicionar 1 ml de solução de tampão fosfato 0,4M pH 7,6 para cada 10 ml de urina. Homogeneizar.

- Enviar refrigerada para o Setor de Microbiologia.

Estabilidade da amostra :

Urina alcalinizada: refrigerada (2-8 ºC): 24 horas

Pesquisa negativa.

Este exame é indicado para diagnosticar a leptospirose, porém apresenta baixa sensibilidade, razão pela qual se recomenda o exame sorológico para o diagnóstico definitivo. Na urina, as leptospiras geralmente estão presentes após a primeira semana de infecção, quando já desapareceram do sangue, e existe a possibilidade de que continuem a ser excretadas por um período de 2 a 3 meses. Apesar disso, a concentração de leptospiras na urina é baixa e sua eliminação pode ser intermitente. A cultura de sangue ou de urina para o isolamento desse agente apresenta maior sensibilidade.

Pesquisa do agente em microscopia de campo escuro e após coloração pelo método de Fontana Tribondeau.