Inovações na abordagem da leucemia linfoide aguda | Revista Médica Ed. 5 - 2009

A detecção de anormalidades por FISH e a ampliação do painel de marcadores imunofenotípicos melhoram a estratificação prognóstica e ajudam a identificar a doença residual pós-tratamento.

A citomorfologia, a imunofenotipagem e a citogenética compõem a tríade clássica da abordagem multifacetada indispensável ao diagnóstico das leucemias linfoides agudas (LLAs). A imunofenotipagem por citometria de fluxo permite a confirmação e a subclassificação dessas leucemias de forma rápida e inequívoca, fornecendo informações essenciais para nortear a decisão terapêutica inicial. Além disso, consegue detectar a doença residual pós-tratamento, o que configura um fator prognóstico de significado clínico bem estabelecido. Uma vez confirmado o diagnóstico, a idade do paciente e a detecção de anormalidades cromossômicas são as variáveis mais relevantes para prever a evolução da leucemia e redirecionar a terapia. O cariótipo permanece como o exame ideal para uma ampla avaliação de todos os cromossomos. Na experiência do Fleury, 80% dos casos de LLA apresentam anormalidades que permitem delinear prognóstico. Nos 20% restantes, porém, ou o estudo se mostra normal ou, em menos de 5% dos pacientes, não há metáfases, o que inviabiliza a obtenção de dados úteis. A hibridação in situ por fluorescência (FISH) é um método citogenéticomolecular que contribui exatamente nessas situações, já que contempla as mutações de maior importância nas leucemias agudas. A técnica possibilita a investigação de diversas alterações genéticas numa única reação por meio de uma plataforma abrangente de sondas.

Análise de células B (CD22+) evidencia ausência da expressão do antígeno CD45 e forte expressão do CD58.

Cariótipo de LLA pré-B com t(1;19) e deleção do braço longo do cromossomo 6.

FISH de uma criança com LLA mostra a deleção do gene P16 (sinal vermelho) no braço curto do cromossomo 9 (p21).

Imunofenotipagem revela doença residual

A identificação de doença residual pós-tratamento pode auxiliar não apenas a determinação do prognóstico, mas também a estratificação prospectiva de risco e a redefinição do tratamento das LLAs. Entre as alterações imunofenotípicas que possibilitam essa investigação estão, por exemplo, a expressão aberrante de antígenos de diferentes linhagens (mieloides), a perda de antígenos normalmente expressos (como o CD45), a coexpressão assíncrona de antígenos de diferentes etapas de maturação (TdT e CD20 na LLA-B) e o aumento na intensidade de antígenos normalmente pouco expressos pelas células linfoides (como o CD58). O limiar de detecção dessas alterações é da ordem de uma célula leucêmica em 10 mil células normais.